
تعداد نشریات | 22 |
تعداد شمارهها | 485 |
تعداد مقالات | 5,045 |
تعداد مشاهده مقاله | 9,291,059 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 6,135,421 |
تهیه سازه اختصاصی بذر حاوی قطعات OMEGA و SAR به منظور افزایش بیان ژن در بذر گیاه | ||
دوفصلنامه فن آوری زیستی در کشاورزی | ||
مقاله 1، دوره 4، شماره 2، آذر 1392، صفحه 1-7 اصل مقاله (336.83 K) | ||
نوع مقاله: مقاله مروری | ||
نویسندگان | ||
مهسا مکانیک* 1؛ خدیجه باقری2؛ بهرام ملکی زنجانی2؛ مسعود توحیدفر3 | ||
1دانش آموخته کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی دانشکده کشاورزی، دانشگاه زنجان، زنجان | ||
2استادیاران گروه زراعت و اصلاح نباتات دانشکده کشاورزی دانشگاه زنجان، زنجان | ||
3استادیار بخش بیوتکنولوژی گیاهی، پژوهشکده بیوتکنولوژی، کرج | ||
چکیده | ||
پایینبودن سطح بیان ژنها، از مهمترین فاکتورهای محدودکننده تولید پروتئینهای نوترکیب در گیاهان میباشد. انتخاب بافت مناسب گیاه جهت بیان و نیز بهبود تظاهر قطعه ژنی از جمله راههای افزایش بیان ژن در گیاه میباشند. در این پژوهش با طراحی و تهیه سازه اختصاصــــی بذر بههــــمراه قطعـــات افزایـــنده بیــان ژن؛ OMEGA(Tobacco Mosaic Virus 5' –leader) و SAR (Scaffold Attachment Region) سعی شده است تا ضمن بیان اختصاصی ژن موردنظر در بذر گیاه، بیان آن نیز افزایش یابد. توالی OMEGA مورد استفاده، بهعنوان یک تنظیمکننده ترجمه عمل میکند و کارآیی ترجمه را بالا میبرد و توالی SAR با مکانیزمهای مختلف میتواند از خاموشی ژن منتقلشده جلوگیری کند. در ابتدا با طراحی آغازگرهای اختصاصی و انجام واکنش PCR قطعه OMEGA به ابتدای ژن GUS متصل شد. قطعهی SAR (pS206-1) نیز از ژنوم گیاه توتون جداسازی گردید. سپس دو قطعه با استفاده از روش SOEingPCR به هم متصل شدند بهنحویکه توالی OMEGA در بالادست ژن GUS و توالی SAR در پاییندست آن قرار گرفت. صحت قطعه حاصله (Ω-GUS-pS206-1) با استفاده از هضم آنزیمی و توالییابی مورد تأیید قرار گرفت. سپس سابکلونینگ در ناقل گیاهی pBI121 حاوی پیشبرنده اختصاصی بذر انجام شد. | ||
کلیدواژهها | ||
سازه اختصاصی بذر؛ SOEingPCR؛ SAR؛ OMEGA؛ افزاینده بیان | ||
مراجع | ||
Allen, G. C., Spiker, S. and Thompson, W. F. 2000. Use of matrix attachment regions (MARs) to minimize transgene silencing. Plant Molecular Biology, 43: 361-376.
Bagheri, Kh., Jalali Javaran, M., Mahboudi, F., Moeini, A. and Zebarjadi, A. 2010. Designing and development of Gama Interfron construct and expression of this protein in Brassica napus seeds. Iranian Journal of Biology. 23 (2): 151-160. (In Persian).
Boothe, J. G., Parmenter, D. L. and Saponja, J. A. 1997. Molecular farming in plants: Oilseeds as vehicles for the production of pharmaceutical proteins. Drug Development Research, 42(3-4): 172-181.
Dellaporta, S. L., Wood, J. and Hicks, J. D. 1983. A plant DNA mini preparation.Version II. Plant Molecular. Biology. Reports, 1: 19-21.
Droogenbroeck, B. V., Cao, J., Stadlmann, J., Altmann, F., Colanesi, S., Hillmer, S., Robinson, D. G., Lerberge, E. V., Terryn, N., Montagu, M. V., Liang, M., Depicker, A. and Jaeger, G. D. 2007. Aberrant localization and under glycosylation of high accumulating single-chain Fv-Fc antibodies in transgenic Arabidopsis seeds. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 104: 1430-1435.
Gallie, D. R. and Walbot, V. 1992. Identification of the motifs within the tobacco Mosaic virus 5' –leader responsible for enhancing translation. Nucleic Acids Research, 20(17): 4631-4638.
Gallie, D. R., Feder, N., Schimke, R. T. and Walbot, V. 1991. Post-transcriptional regulation in higher eukaryotes: the role of the reporter gene in controlling expression. Molecular and General Genetics, 228: 258-264.
Leelavathi, S. and Reddy, V. S. 2003. Chloroplast expression of His-tagged GUS-fusions: a general strategy to overproduce and purify foreign proteins using transplastomic plants as bioreactors. Molecular Breeding, 11: 49-58.
Mandeles, S. 1968. Location of unique sequences in tobacco mosaic virus ribonucleic acid. The Journal of Biological Chemistry, 243(13): 3671-3674.
Mohsenpour, M., Tohidfar, M., Babaeian, N. A., and Habashi, A. A. 2007. Design and construction of a recombinant plasmid pBI121-Glu in order to Agrobacterium mediated transformation of cotton. Journal of Agricultural Sciences and Natural Resources 14(4): 112-124. (In Persian).
Murashige, T. and Skoog, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Plant Physiology, 15: 473- 497.
Swarnalatha, D. I., Dinesh kumar, V., Ansari, N. A. and Sivasankar, A. 2010. Studies on the expression pattern of seed-specific napin promoter (BcNAI) in transgenic (Nicotiana tabacum L.) tobacco seeds. International Journal of Environmental Science and Development, 1: 20-23.
Thompson, W. F., Spiker, S. and Allen, G. C. 2006. Matrix attachment regions and transcriptional gene silencing. BLUK050-Grasser, 136-161.
Twyman, R. M., Stoger, E., Schillberg, S., Christou, P. and Fischer, R. 2003. Molecular farming in plants: Host systems and expression technology. Trends in Biotechnology, 21: 570-578.
Xue, H., Yang, Y. T., Wu, C. A., Yang, G. D., Zhang, M. M. and Zheng, C. C. 2005. TM2, a novel strong matrix attachment region isolated from tobacco, increases transgene expression in transgenic rice calli and plants. Theoretical and Applied Genetics, 110: 620-627.
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,761 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,564 |