
تعداد نشریات | 22 |
تعداد شمارهها | 485 |
تعداد مقالات | 5,045 |
تعداد مشاهده مقاله | 9,291,006 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 6,135,403 |
انتقال و بیان ژنهای پروتئین پوششی ویروسهای Y سیبزمینی نژاد نکروتیک (PVYN) و ویروس S سیبزمینی در سیبزمینی رقم آگریا (Agria Solanum tubersum var) | ||
دوفصلنامه فن آوری زیستی در کشاورزی | ||
مقاله 5، دوره 4، شماره 1، خرداد 1392، صفحه 35-45 اصل مقاله (661.21 K) | ||
نوع مقاله: علمی - پژوهشی | ||
نویسندگان | ||
احسان انصاری دزفولی1؛ حسین معصومی* 2؛ هاله هاشمی3 | ||
1دانشجوی سابق کارشناسی ارشد گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان | ||
2دانشیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان | ||
3دانشیار پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیستفناوری، تهران | ||
چکیده | ||
در این بررسی پس از نمونهبرداری از مزارع کشت سیبزمینی در شهرستان بردسیر استان کرمان، گیاهان آلوده نسبت به نژاد نکروتیک ویروس Y سیبزمینی (PVYN) و ویروس S سیبزمینی (PVS) توسط آزمون سرولوژیکی ساندویچ دو طرفه الایزا (DAS-ELISA) جداسازی شدند. پس از استخراج RNA کل از گیاهان آزمون، با استفاده از واکنش RT-PCR ژن پروتئین پوششی (CP) این دو ویروس تکثیر و بهطور جداگانه در پلاسمید PTZ57R/T همسانهسازی شدند، پس از توالییابی و اطمینان از مطابقت توالی ژنهای PVYN-CP و PVS-CP با توالیهای این دو ویروس در بانک ژن، این دو ژن در ناقل بیانی pBI121 همسانهسازی گردیدند. دو سازه حاصله شامل pBI-PVYN-CP و pBI-PVS-CP به دو آگروباکتریوم مجزای GV3850 منتقل و جهت تراژنی دیسکهای ریزغده مورد استفاده قرار گرفتند. گیاهان ترارژن پس از ریشهدار شدن و انتقال به گلدانها، جهت بررسی حضور و بیان ژنهای PVYN-CP و PVS-CP توسط واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) و آزمون سرولوژیکی الایزا مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج حاصله از PCR بر روی 20 لاین مقاوم به کانامایسین، نشان داد که بهترتیب 6 و 4 لاین دارای تراژنهای الحاقی PVYN-CP و PVS-CP در ژنوم خود میباشند. همچنین دو لاین نیز حاوی تراژنهای الحاقی مربوط به هر دو ویروس بودهاند و بیان این ژنها بهصورت همزمان ولی مجزا صورت گرفت. | ||
کلیدواژهها | ||
گیاهان تراریخت؛ بیماریهای ویروسی؛ گیاه سیبزمینی | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,824 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,105 |