
تعداد نشریات | 22 |
تعداد شمارهها | 485 |
تعداد مقالات | 5,052 |
تعداد مشاهده مقاله | 9,296,986 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 6,139,829 |
تولید آنتیبادی پلیکلونال علیه پروتئین حرکتی ویروس پیچیدگی زرد برگ گوجهفرنگی و بررسی کارآیی آن در ردیابی ویروس | ||
دوفصلنامه فن آوری زیستی در کشاورزی | ||
مقاله 4، دوره 6، شماره 2، آذر 1394، صفحه 33-37 اصل مقاله (424.87 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
نویسندگان | ||
سجاد مرادی1؛ مسعود شمس بخش* 2؛ ناصر صفایی2 | ||
1دانشجوی سابق کارشناسیارشد گروه بیماریشناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران | ||
2دانشیار گروه بیماریشناسیگیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران | ||
چکیده | ||
بیماری ویروسی پیچیدگی زرد برگ گوجه فرنگی از مهمترین بیماریهای ویروسی گوجه فرنگی (Solanum lycopersicum L.) در مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری و گلخانههای مناطق معتدل جهان بهشمار میرود. بهمنظور تولید آنتی بادی علیه ویروس عامل بیماری برای استفاده در ردیابی و معرفی کیت تشخیص بیماری، پروتئین حرکتی همسانه سازی شده ویروس در ناقل بیانی pET26(b)+، از سویه BL21(DE3) باکتری Escherichia coli بیان شد و پروتئین نوترکیب استخراج و به خرگوش تزریق شد. آنتیسرم تهیه شده، بهمنظور بررسی کارآیی در ردیابی پروتئین بیان شده در باکتری و تشخیص ویروس در گیاهان آلوده، در آزمونهای وسترنبلات و الایزا مورد استفاده قرار گرفت. در آزمون وسترنبلات و رقت 1 به 1500 آنتیسرم، باند 13 کیلودالتونی مربوط به پروتئین حرکتی ویروس را در گیاهان آلوده ردیابی کرد. در آزمون الایزا و رقت 1 به 1000 آنتی سرم، واسرشته کردن پروتئین سبب افزایش جذب نوری در نمونههای گیاهان آلوده شد هرچند این اختلاف از نظر آماری معنیدار نبود. این نتایج نشان داد که آنتیسرم تولید شده علیه پروتئین حرکتی ویروس پیچیدگی زرد برگ گوجهفرنگی برای آزمون وسترنبلات مناسب بوده و جهت استفاده در آزمون الایزا نیاز به تخلیص آنتی بادی دارد. | ||
کلیدواژهها | ||
TYLCV؛ آنتیسرم؛ الایزا؛ پروتئین نوترکیب | ||
مراجع | ||
Abou-Jawdah, Y., Sobh, H., Cordahi, N., Kawtharani, H., Nemer, G., Maxwell, D. P. and Nakhla, M. K. 2004. Immunodiagnosis of Prune dwarf virus using antiserum produced to its recombinant coat protein. Journal of Virological Methods, 121 (1): 31-38.
Abouzid, A., Freitas-Astua, J., Purcifull, D., Polston, J., Beckham, K., Crawford, W., Petersen, M., Peyser, B., Patte, C. and Hiebert, E. 2002. Serological studies using polyclonal antisera prepared against the viral coat protein of four begomoviruses expressed in Escherichia coli. Plant Disease,86 (10): 1109-1114.
Azizi, A., Mozafari, J. and Shams-bakhsh, M. 2008. Phenotypic and molecular screening of tomato germplasm for resistance to Tomato yellow leaf curl virus. Iranian Jornal of Biotechnology, 6 (4): 199-206.
Azizi, A., Shams-Bakhsh, M., Mozafari, J. and Montazeri-Hedesh, R. 2011. Complete genomic sequence of a strain of Tomato yellow leaf curl virus from Iran. Iranian Journal of Virology, 5 (3): 18-27.
Behjatnia, S. A. A., Izadpanah, K., Dry, I. B. and Rezaian, M. A. 2004. Molecular characterization and taxonomic position of the Iranian isolate of Tomato leaf curl virus. Iranian Journal of Plant Pathology, 40: 77-94.
Cerovska, N., Filigarova, M. and Pečenková, T. 2006. Production of polyclonal antibodies to a recombinant Potato mop‐top virus non‐structural triple gene block protein 1. Journal of Phytopathology, 154: 422-427.
Cerovska, N., Moravec, T., Plchova, H., Hoffmeisterova, H. and Dedic, P. 2012. Production of polyclonal antibodies to the recombinant potato virus M (PVM) non‐structural triple gene block protein 1 and coat protein. Journal of Phytopathology, 160 (5): 251-254.
Clark, M. F. and Adams, A. 1977. Characteristics of the microplate method of enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of plant viruses. Journal of General Virology, 34 (3): 475-483.
Folwarczna, J., Plchova, H., Moravec, T., Hoffmeisterova, H., Dědič, P. and Čeřovská, N. 2008. Production of polyclonal antibodies to a recombinant coat protein of potato virus Y. Folia Microbiologica, 53 (5): 438-442.
Fukuta, S., Kato, S., Yoshida, K., Mizukami, Y., Ishida, A., Ueda, J., Kanbe, M. and Ishimoto, Y. 2003. Detection of Tomato yellow leaf curl virus by loop-mediated isothermal amplification reaction. Journal of Virological Methods, 112 (1): 35-40.
Hajimorad, M., Kheyr‐Pour, A., Alavi, V., Ahoonmanesh, A., Bahar, M., Rezaian, M. and Gronenborn, B. 1996. Identification of whitefly transmitted tomato yellow leaf curl geminivirus from Iran and a survey of its distribution with molecular probes. Plant Pathology, 45 (3): 418-425.
Hull, R. 2009. Comparative plant virology. Academic Press, 364pp.
Nickel, O., Targon, M. L., Fajardo, T. V., Machado, M. A. and Trivilin, A. P. 2004. Polyclonal antibodies to the coat protein of Apple stem grooving virus expressed in Escherichia coli: production and use in immunodiagnosis. Fitopatologia Brasileira, 29 (5): 558-562.
Plchova, H., Moravec, T., Dedic, P. and Cerovska, N. 2011. Expression of recombinant Potato leaf roll virus structural and non‐structural proteins for antibody production. Journal of Phytopathology, 59 (2): 130-132.
Salimi, M., Shams-Bakhsh, M. and Safaie, N. 2012. Expression of the Tomato yellow leaf curl virus movement protein gene in Escherchia coli. Trakia Journal of Sciences, 10 (3): 36-40.
Saravanan, R. S. and Rose, J. K. 2004. A critical evaluation of sample extraction techniques for enhanced proteomic analysis of recalcitrant plant tissues. Proteomics, 4 (9): 2522-2532.
Schulz, G. E. and Schirmer, R. H. 1979. Principles of protein structure. Springer-Verlag KG, 690 pp.
Shams-bakhsh, M. and Symons, R. H. 2004. Cloning and expression of the coat protein gene of Barley yellow dwarf virus-PAV in Escherichia coli. Iranian Journal of Biotechnology, 2: 84-89.
Walker, J. M. and Rapley, R. 2007. Recombinant DNA technology, McGraw Hill Inc. 480pp. | ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,282 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,111 |