آمار
| تعداد نشریات | 22 |
| تعداد شماره‌ها | 485 |
| تعداد مقالات | 5,045 |
| تعداد مشاهده مقاله | 9,291,057 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 6,135,420 |
الکتروفورز افقی پلیاکریلآمید با استفاده از چاهک‌های ژل‌آگارز | ||
| دوفصلنامه فن آوری زیستی در کشاورزی | ||
| مقاله 4، دوره 6، شماره 1، خرداد 1394، صفحه 33-37 اصل مقاله (242.63 K) | ||
| نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
| نویسندگان | ||
| محمد حسین صفری1؛ اصغر میرزایی اصل* 2 | ||
| 1دانش‌آموخته کارشناسی‌ارشد گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی دانشگاه بوعلی‌سینا، همدان | ||
| 2استادیار گروه بیوتکنولوژی، دانشکده کشاورزی دانشگاه بوعلی‌سینا، همدان | ||
| چکیده | ||
| الکتروفورز افقی ژل‌آگارز، یکی از ابزارهای پایه در زیست‌شناسی مولکولی است. این روش آسان و سریع بوده، استفاده از آن نیاز به مهارت زیادی ندارد. یکی از معایب ژل‌آگارز این است که جداسازی قطعات کوچک DNA با تفاوتهای ناچیز در حد چند جفت باز و همچنین تفکیک قطعات کوچک مولکولهای DNA و پروتئین در این ژل به‌خوبی امکان‌پذیر نیست که به‌طور متداول در این موارد از ژل پلیاکریلآمید استفاده میشود. الکتروفورز عمودی ژل پلیاکریلآمید علیرغم مزایایی که دارد ولی روشی پیچیده، گران و زمان‌بر میباشد. اخیراً روشی برای الکتروفورز ژل پلیاکریلآمید به‌صورت افقی معرفی شده است که ضمن داشتن مزایا نسبت به روش عمودی، ولی نیازمند ساخت دستگاهی جدید جهت انجام عمل الکتروفورز میباشد. در این پژوهش از دستگاه الکتروفورز افقی ژل‌آگارز با اندکی تغییرات، به‌منظور انجام الکتروفورز ژل پلیاکریلآمید برای قطعات DNA تکثیر شونده توسط نشانگرهای ریزماهوارهای استفاده شد. در این روش عمل الکتروفورز ژل پلیاکریلآمید، به‌صورت افقی و با استفاده از ژل دو قسمتی آگارز و پلیاکریلآمید انجام شد. نتایج نشان داد باندهای حاصل از الکتروفورز کاملاً شفاف و واضح میباشند. همچنین در این روش، مشکلات تشکیل حباب در ژل و پارگی ژل، در هنگام جداسازی شیشه از ژل، وجود ندارد. دستگاه الکتروفورز معرفی شده، دو منظوره است که میتوان از آن هم برای ژل آگارز و هم برای ژل پلیاکریلآمید استفاده نمود. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| الکتروفورز افقی؛ ژل پلیاکریلآمید؛ ژل‌آگارز | ||
| مراجع | ||
|
Bridgham, A., Hoff, B., Mayrand, P. and Shigeura, J. 1994. Horizontal polyacrylamide gel electrophoresis. USA patent No: US5338426 A.
Gomez, S. M., Denvar, N. N., Ramasubramanian, T., Simpson, C. E., Burow, G., Burke, J. J., Puppala, N. and Burow, M.D. 2008. Identification of peanut hybrids using microsatellite markers and horizontal polyacrylamide gel electrophoresis. Plant Science, 35: 123-129.
Izzo, V., Costa, M. A., Fiore, Rd., Duro, G., Bellavia. D., Cascone, E., Colombo, P., Gioviale, M. C. and Barbieri, R. 2006. Electrophoresis of proteins and DNA on horizontal sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels. Immunity and Ageing, 3(7): 1-5.
Marcheylo, B. A., handel, K. A. and Mellish, V. J. 1989 Fast horizontal Sodium Dodecyl Sulfate gradient polyacrylamide gel electrophoresis for rapid wheat cultivar identification and analysis of high molecular weight glutenin subunits. Cereal Chemistry, 66(3): 186-192.
Sambrook, J., Fritsch, E. F. and Maniatis, T. 2001. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 3nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory, 545 p.
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 4,480 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 5,085 |
||